体细胞育苗

根据细胞全能性的原理，将紫菜叶状体的体细胞经酶解，分离成单个细胞，直接发育成幼苗，以此作为苗种的来源可起到与壳孢子采苗同样的效果。采用体细胞育苗，可提高单位水体紫菜育苗量和育苗效益。紫菜体细胞育苗技术主要包括：种藻选择和保藏，种藻的复苏，酶解与细胞收集，体细胞培养，采苗。

种藻选择和保藏 种藻选择主要注意选择的季节、藻体的大小、藻体的健康度。在江苏，条斑紫菜一般选择在2月中旬到4月上旬的藻体，坛紫菜则尽量选择10月上、中旬日龄为30～40天幼苗;条斑紫菜宜小，选择的藻体表面要有光泽、有韧性、无附着杂藻。

选好的种藻先用清洁海水洗去种藻表面附泥及杂藻，然后置通风处阴凉至半干，迅速用无毒塑料袋扎密封再冷藏于1～2℃的冰箱或冷库备用。

种藻复苏 将冷藏的种藻取出后立即浸泡于温度为10～20℃的自然海水中，经再次挑选后，放入比重为1.026的消毒海水(加N—NO ，10ppm，P—PO ，1ppm)中培养2～3天，培养条件为：光照1000～2000勒克斯，光周期12：12HD，温度18～20℃，冲气培养。

酶解与体细胞收集 酶解前，将种藻用消毒海水清洗数次，切成小块(1～2平方毫米)，再用海水洗数次，然后吸干称量待用。目前我国使用的酶有海螺酶、鲍鱼酶、 琼胶酶和 纤维素酶。只用 纤维素酶不能酶解出紫菜的单细胞来，而用数种酶按一定比例配好效果更佳。

酶液配制步骤为：酶溶剂的配制、酶粉的称取、pH值的调整。坛紫菜酶溶剂多用2摩尔(克分子)的葡萄糖溶液作酶溶剂，条斑紫菜用0.7～0.8摩尔的甘露醇另加0.1% 氯化钙、0.1硫酸镁的无菌海水为酶溶剂较好。酶粉一般按每克种藻用10毫升酶液的比例来称取。酶液在酸性情况下酶解效果好，可用1盐酸或氢氧化钠调整酶液pH值在5.8～6.5。坛紫菜最适酶解温度为28～29℃，条斑紫菜最适温度为25～27℃。酶解pH值为6.0～6.5。酶解过程采用摇床摇动，效果很好。另外，种藻的不同种类与酶解时间也是影响酶解效果因素。把处理的种藻放在配制好的酶液中，调控所需温度，同时放在摇床上、黑暗条件下振荡(每分钟100转)，酶解1小时后开始镜检有无离解细胞，以后每隔10～15分钟检查1次，直至认为已达一定量细胞为止。酶解结束后，先将酶细胞液用60微米筛绢过滤，将过滤液用手摇离心机或电动离心机离心，上面酶液可重新利用，离心沉淀的细胞用1.030比重的无毒海水悬浮细胞，再离心，如此重复3次，每次离心5分钟(1500rpm)，充分洗去酶液。最后将获得细胞放入比重1.034MES培养液中培养。

体细胞培养 体细膜培养方式。体细胞培养方式分为平面培养(以静止为主)、悬浮培养(立体培养)、池培养(兼平面与立体两种方式)。其光照强度最高需3000勒克斯;水温控制在20℃，最高不超过23℃;定时添加培养液并定时更换新的培养用水;通气要合适。日常管理工作主要是光照、温度的控制、换水、培养用水、镜检细胞生存率等。

采苗 体细胞采苗方法有直接采苗法、条斑紫菜的孢子采苗、固定化法。