狼虽不挑剔猎物，但主要的猎物是中到大型的有蹄类动物(如美洲野牛是狼的10-15倍大)，如果猎物不足，中型与小型猎物可以补充如土拨鼠、河狸、野兔、獾、狐狸、貂、地松鼠、鼠类、仓鼠、田鼠和其它啮齿目动物及食虫动物。
他们常吃水鸟和它们的蛋，特别是在换毛期和冬季，这种需要将脂肪转变成自身脂肪的时期。当食物不足时，他们会吃蜥蜴、蛇、蛙类、很少吃蟾蜍，如果有的话也吃大型昆虫。如果食物稀缺时狼也会吃腐肉，他们会出现在屠宰场、家畜掩埋场。阿斯特拉罕的狼群会在里海海岸猎捕里海海豹。
阿拉斯加和加拿大西部的狼也吃鲑鱼。狼同类相食并不罕见，在严寒的冬季狼群常攻击孱弱或受伤的狼，并可能吃掉死去狼群成员尸体。但是，不知道它们是否像郊狼那样，有时会吃掉幼狼。虽然有时狼会攻击人类，但次数很少。狼会以水果、植物补充食物，它们吃花楸属的浆果、铃兰、蓝莓、越橘等，其它水果包括茄科植物、苹果、梨。夏季期间，它们会出现在瓜田觅食。狼可以很长时间不进食，两周没有食物不会明显减弱灰狼的体力。
在欧亚洲人类活动密集的区域，许多狼被迫猎食人类豢养的牲畜、或垃圾。虽然在俄国和东欧多山地区，野生有蹄类动物如驼鹿、红鹿、西方狍、和野猪仍是，最主要的食物来源。其他猎物包括驯鹿、盘羊、欧洲野牛、塞加羚羊、山羊、臆羚、野山羊、黇鹿和香獐。北美灰狼的猎物依然大量占有适合它们，且人类分布稀疏的区域为栖息地，除了改以人类垃圾及牲畜为主食以外的狼群，北美灰狼偏好的猎物包括驼鹿、白尾鹿、加拿大马鹿、骡鹿、大角羊、白大角羊、美洲野牛、麝牛，和驯鹿。在北美灰狼会吃多种不同的农作物、蔬菜和人类畜养的动物。
如果与其他犬科动物共存在同一区域，狼通常占优势。在北美常见郊狼被灰狼杀死，特别是在冬季，当这种情况发生时，灰狼可能会攻击郊狼的巢穴，找出并杀死幼郊狼。它们很少吃杀死的郊狼尸体。虽然当郊狼数量多时，郊狼可能追击灰狼，但没有郊狼杀死灰狼的纪录。在欧亚洲，灰狼与亚洲胡狼也有很多遭遇的机会，亚洲胡狼的数量在灰狼多的地区相对少。灰狼在春夏之际猎杀大量的貉，是其最主要的天敌。灰狼也杀害赤狐、北极狐、沙狐，其冲突原因胜过猎食，但灰狼也可能吃掉杀死的狐。在亚洲，它们要生存可能要与亚洲豺犬竞争。
灰狼在欧亚与美洲都会碰上棕熊，这种遭遇的结果依环境而定。一般来说冲突原因高于猎食时，棕熊的优势胜过狼群；但在保护自己的狼穴时，狼群多半会击退棕熊。虽然棕熊的体态与力量都远比单一灰狼大，狼群却可以靠数量多与棕熊抗衡。这两个物种都会杀死对方的幼兽。狼会吃掉它们杀死的棕熊，而棕熊似乎只吃比较年轻的狼。
美洲黑熊仅美洲才有，由于对栖息地喜好不同，灰狼与北美黑熊遭遇的机会远少于棕熊，它们的遭遇多数发生在黑熊分布地的北侧。墨西哥没有黑熊与灰狼遭遇纪录。灰狼有多次纪录主动追寻黑熊(主要是年幼黑熊)到熊窝，杀死但没有吃幼熊。与棕熊不同，黑熊与灰狼群冲突的结果，时常是输掉生命。
与棕熊和黑熊相比，北极熊与灰狼遭遇机会非常少，虽然有两次狼群杀死幼北极熊的纪录。狼群也会杀死年幼的亚洲黑熊。已经知道当狼群在白天攻击熊时，狼群会将最后致命的攻击延迟到夜晚，因为狼的夜视能力比熊好。
狼群在以色列和中亚会遇到条纹鬣狗，生存竞争原因高于猎食。在这两个物种并存的区域，鬣狗大量依赖狼群杀死的猎物腐肉维生，一对一的情况下，鬣狗胜过灰狼，但狼群能击退落单的鬣狗。
狼数量多时，会限制中小型的猫亚科动物的数量。在部份洛矶山脉和相接的山区，灰狼会遇到美洲狮，由于狩猎海拔高度不同，狼群与美洲狮会互相回避，但在冬季，积雪会迫使它们到山谷狩猎，它们彼次相遇的可能性就会增加。尽管它们相碰的机会不多，但狼群与美洲狮会杀害对方，狼群有时也夺走美洲狮猎得的猎物。亚洲的狼群猎食兔狲，可能也对雪豹构成威胁，并可能造成欧亚猞猁数量的减少。
除了人类生存对灰狼构成竞争压力以外，虎似乎是唯一猎捕灰狼的动物。当灰狼与虎猎食区域重叠时，如西伯利亚东部，就会造成此二者剧烈的生存竞争。在锡霍特山脉有狼与虎很好的遭遇纪录。直到20世纪初，该地区狼的数量非常少。一些专家认为，当俄罗斯人于19世纪末20世纪初殖民该地区而大量消灭虎时，狼的数量才上升。这可由当地住民描述他们在1930年代虎被大量消灭以前，不记得有狼群在当地栖息一事而得到证实。虎的存在抑制狼的数量，不论是区域性的绝迹或数量少到不足以在生态系统上构成有意义的因素，似乎只有在人类减少虎的数量后，狼群才能摆脱竞争排除。
今天在虎的栖息地，狼的数量依然稀少，发现的都是散落的狼群，通常是单一只或小群。第一手的资料显示当二者遭遇时，虎有时会驱赶狼离开它的猎物，而狼会吃虎所猎食的腐肉。狼被虎杀死的实际例证很少，虽然有四例经证实，虎杀害狼而没有吃掉它们，攻击似乎因为竞争而非猎食天性。
狼被虎竞争排除的事例被俄罗斯人拿来教育远东地区的猎人，要多宽容虎，因为虎对有蹄类动物的影响不如狼，但却可以有效控制狼的数量。
阴阳平衡