⑴取胚乳切片,加硫钒酸1滴,显蓝紫色(番木鳖碱反应);另取切片加浓硝酸,显橙红色。(马钱子碱反应)
⑵取马钱子粗粉1g,加乙醇15ml,冷浸2h,滤液蒸干,加1mol/L盐酸溶解,以氧氢化铵试液碱化,氯仿提取,氯仿液再以1mol/L盐酸提取,酸液中加锌粉及浓盐酸,水浴加热5min,冷后加亚硝酸溶液1滴,即显樱红色。(番木鳖碱反应)
(3)薄层层析:取粉末0.5g,加氯仿-乙醇(10:1)混合液5ml及浓氨水溶液0.5ml,振摇5min,放置2h,滤液供试,另取番木鳖碱、马钱子碱加氯仿溶解,制成每1ml各含2mg的混合液作对照。各取10μl分别点样于同一硅胶G板上,以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨溶液(40:50:6:4) 展开15cm,取出晾干,喷以稀碘化铋试液,对照品显两橙色斑点,马钱子碱在下方,番木鳖碱在上方,供试品显相同的色斑。
【附注】:同属植物云南马钱S.pierriana A.W.Hill.的种子亦作马钱子入药。
马钱子苷的分子式马钱种子含多种生物碱,可分为三种类型:
①“正”系列(normal series )生物碱:番木鳖碱(strychnine),马钱子碱(brucine),异番木鳖碱(isostrychnine),异马钱子碱(isobrucine),番木鳖碱N-氧化物(strychnine N-oxide),马钱子碱N-氧化物(brucine N-oxide),β-可鲁勃林(β-colubrine),16-羟基-β-可鲁勃林(16-hydroxy-β-colubrine),16-羟基-α-可鲁勃林。
②“伪”系列(pseudo series )生物碱:伪番木鳖碱(pseudo-strychnine),伪马钱子碱(pseudobrucine)。
③“N”-甲基伪”系列(N-methylpseudo series)
生物碱:N-甲基-断-伪番木鳖碱(icajine),番木鳖次碱(vomicine),N-甲基-断-伪马钱子碱(no-vacine)。
种子所含生物碱以“正”系列为主。种子经高温加热(220~260℃,3min),剧毒成分番木鳖碱、马钱子碱含量明显降低,而异番木鳖碱、异马钱子碱、番木鳖碱N-氧化物及马钱子碱N-氧化物含量增高。
根皮、根木质部含“正”系列生物碱为主,茎皮含“伪”及“N-甲基伪”系列生物碱为主,叶则含“N-甲基伪”系列生物碱为主。果皮、果肉均含番木鳖碱,马钱子碱,4-羟基番木鳖碱(4-hydroxystrychnine),番木鳖碱N-氧化物,马钱子碱N-氧化物,伪番木鳖碱,伪马钱子碱,N-甲基-断-伪番木鳖碱,番木鳖次碱,N-甲基-断-伪马钱子碱,果肉另含β-可鲁勃林。果肉还含环烯醚单萜类(iridoid)化合物:马钱子甙(loganin),马钱子甙酸(lo-ganic acid),去氧马钱子甙(deoxyloganin),马钱子酮甙(ketolo-ganin),开链马钱子甙(secologanin)。
长籽马钱种子含多种生物碱,可分为三种类型:
①“正”系列生物碱:4-羟基-3-甲氧基-番木鳖碱(4- hydroxy-3-methoxystrychnine),番木鳖碱,马钱子碱,4-羟基番木鳖碱,番木鳖碱N-氧化物,α-可鲁勃林。
②“伪”系列生物碱:伪番木鳖碱,伪马钱子碱。
③“N-甲基伪”系列生物碱:N-甲基-断-伪番木鳖碱,番木鳖次碱,N-甲基-断-伪马钱子碱及4-羟基-3-甲氧基-N-甲基-断-伪番木鳖碱(4-hydroxy-3-methoxy-N-methyl-sec-pseu-dostrychnine)。
种子所含生物碱以“正”系列为主,叶则含“N-甲基伪”系列生物碱为主。
此外,叶还含有N-氰基-断-伪番木鳖碱(N-cyano-sec-pseudostrychnine)及N-氰基-断-伪马钱子碱(N-cyano-sec-pseu-dobrucine)。