1.取胚乳切片,加硫钒酸1滴,显蓝紫色(番木鳖碱反应);另取切片加浓硝酸,显橙红色(马钱子碱反应).
2.取该品粗粉1 g,加乙醇15 ml,冷浸2小时,滤液蒸干,以1N盐酸溶解,加氢氧化铵碱化,氯仿提取,氯仿液再用1N盐酸提取,酸液中加锌粉及浓盐酸,水浴加热5分钟,冷却后加亚硝酸溶液1滴,即显樱红色 (番木鳖碱反应).
马钱子3.薄层层析:
⑴ 马钱子碱。
⑵ 番木鳖碱。
⑶ 马钱子(对照药材)。
⑷ 云南马钱(对照药材)。
⑸ 马钱子(商品)。
⑹ 制马钱。
样 品 液:取粉末0.5 g,加氯仿-乙醇(10∶1)混合液5 ml及浓氨水溶液0.5 ml,振摇5分钟,放置2小时,滤液供试;
对照品液:另取番木鳖碱,马钱子碱加氯仿溶解,制成每1 ml各含2 mg的混合液作对照溶液.
展 开:取10μl分别点样于同一硅胶G板上,用甲苯-丙酮-乙醇-浓氨溶液展开.
显 色:喷稀碘化铋钾试液,对照品显两橙色斑点,马钱子碱在下方,番木鳖碱在上方,供试品显相同的色 斑.
用高效液相色谱法测定.色谱条件与系统适用性试验:用硅胶为填充剂;正己烷-二氯甲烷一甲醇一浓氨试液(42.5:42.5:5:0.35)为流动相;检测波长为254nm.理论板数按士的宁峰计算应不低于2000.
对照品溶液的制备:精密称取士的宁对照品适量,加醋酸乙酷制成每1ml含0.4mg的溶液,即得.供试品溶液的制备:取该品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加氯仿25ml与浓氨试液1ml,密塞,轻轻振摇,称定重量,放置24小时,再称定重量,用氯仿补足减失的重量,充分振摇,滤过,精密量取滤液10ml,置分液漏斗中,用硫酸溶液(3→100)提取5次,每次15ml,合并硫酸液,加浓氨试液调节pH值至9~10,用氯仿提取5次,每次20ml,合并氯仿液,蒸干,残渣加醋酸乙酯溶解,转移至10ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得.
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各4μl,注人液相色谱仪,测定,即得.该品按干燥品计算,含士的宁(C21H22N2O2)应为1.20%~2.20%.